五指山猪小群体遗传学检测

本研究利用26个微卫星基因座对中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所保种场的五指山猪小群体58个样本进行了遗传学检测,用非变性(中性)聚丙烯酰胺凝胶电泳检测微卫星的PCR扩增产物,统计了群体平均基因纯合率、等位基因数,利用等位基因频率计算出各群体的平均遗传杂合度(H)、多态信息含量(PIC)。统计结果:全群平均基因纯合率为66.5%;平均多态信息含量、平均观测杂合度为、平均期望杂合度分别为0.807、0.338、0.835;每个位点平均等位基因数为11.92,此结果说明该群体虽然近交程度较高,但仍具有丰富的遗传多样性,遗传变异较大。     

饲养层细胞对胚胎干细胞的影响及其分离培养的影响因素

胚胎干细胞及其相关研究是生命科学领域中最有活力、最有影响力、最有应用前景的研究方向之一，它与遗传工程，转基因技术等相结合具有重大的理论意义与实践价值。饲养层细胞在胚胎干细胞分离培养的过程中起着异常重要的作用。作者结合实践经验就饲养层细胞对胚胎干细胞的影响进行了概述，介绍了饲养层细胞的分类，并分析了饲养层细胞分离培养的影响因素。     

甘氨胆酸对小鼠免疫功能的影响

目的:观察甘氨胆酸(Glycocholic acid,GCA)对正常及免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法:应用环磷酰胺或环孢菌素A所致的免疫抑制模型;采用ELISA及比色法观察了GCA对体液免疫的影响,碳廓清法测定了GCA对单核巨噬细胞的吞噬功能的影响,迟发型皮肤变态反应法观察了GCA对二硝基氯苯丙酮溶液所致小鼠迟发型皮肤过敏反应的影响,并测定了血清中IL-2、TNF-α的含量。采用流式细胞术检测了GCA对小鼠外周血T细胞亚群CD4、CD8比例的影响。结果:GCA能够显著增强正常及抑制小鼠的IgMI、gG的含量;增加外周血中T淋巴细胞CD4比例,使CD4 /CD8 比值提高;显著抑制迟发型皮肤变态反应的发生,并增加IL-2及TNF-α的含量。结论:GCA能够显著提高非特异性免疫功能;显著增强机体的体液免疫能力;显著抑制迟发型变态反应,增强正常及CsA抑制小鼠CD4 百分率、CD4 /CD8 比值,GCA具有调节机体免疫功能的作用。     

野猪和家猪MC4R基因的分子扫描及两个变异位点的PCR-RFLP分析

黑素皮质素受体4是在人类肥胖研究中发现的重要调节因子,参与调节动物的体重、采食量和能量稳态。猪MC4R基因第7跨膜结构功能域的一个高度保守区内的错义突变(G→A)与脂肪性状相关显著。本研究对野猪、民猪、大白猪MC4R基因进行克隆测序,寻找新的多态位点;并对其中的HindⅢ和ClaⅠ位点的突变进行了酶切多态性分析,建立了基于限制性内切酶HindⅢ和ClaⅠ的MC4R基因型的PCR-RFLP分子检测方法。     

大熊猫犬冠状病毒部分S基因的克隆与全S基因序列分析

从重庆某动物园死亡的大熊猫肝脏中分离到一株病毒，经鉴定为犬冠状病毒（命名为CCV DXMV）。本实验根据CCV K378和CCV Insavc-1株基因序列设计合成了普通PCR引物SF1-SR1和SF2-SR2，以及半套式引物SF3-SR3、SR13、SF13、SF4-SR4和SF14，分段扩增了CCVDXMV株部分S基因，得到了368bp、792bp、737bp、1178bp和985bp5个基因片段。将纯化的RCR产物分别克隆到pGEM—T载体中，通过筛选和鉴定，获得了5个阳性重组质粒。将重组质粒送生物公司测序，将测得的基因序列与先前测定的该株病毒部分S基因序列，拼接成全S基因序列，并与其它株CCV及TGEV HN2002和FIPV79—1146株的S基因序列进行分析比较，绘制进化树。结果表明，该株病毒与CCV K378株的同源性最高，达到99．4％；而与CCV 23／03株的同源性最低，为56．9％；与FIPV和TGEV分别有90．4％和82．1％的同源性。     

青海血蜱cDNA表达文库的免疫学筛选和阳性克隆的鉴定

为获得抗青海血蜱免疫原基因，用免抗青海血蜱差异蛋白阳性血清和兔抗青海血蜱唾液蛋白阳性血清对青海血蜱cDNA表达文库进行了免疫学筛选，经过初筛和复筛共获得58个阳性信号。用所得阳性噬菌体转染宿主菌BM25．8使之自动亚克隆为重组质粒，用此亚克隆质粒转化宿主菌JM109并从中提取重组质粒进行PCR、酶切和测序分析。序列分析表明：共获得新cDNA序列21个。将前5个cDNA登录GenBank／ncbi，获取登录号。所获阳性克隆为青海血蜱保护性抗原的筛选奠定了基础。     

Exogenous carbon monoxide protects against the lung injury induced by ischemia-reperfusion of hind limbs in rats

AIM: To study the mechanism of protective effect of exogenous carbon monoxide (CO) in the lung injury induced by ischemia-reperfusion (IR) of hind limbs in rats. METHODS: Thirty-two SD rats were randomly divided into 4 groups: control, control+CO, IR and IR+CO. A rat model of ischemia in hind limbs and the reperfusion lung injury was made. The rats in IR+CO and control+CO groups were exposed to air containing 2.5×10-8 CO for 1 h before reperfusion or the corresponding control time point, while the other two groups were exposed to the routine air. The lung tissue structure, polymorphonuclear leukocyte (PMN) count, wet-to-dry weight ratio (W/D), malondialdehyde (MDA) content and the animal survival rate were observed. The carboxyhemoglobin (COHb) levels in artery blood were detected with CO-oximeter and the expression of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) in the lung was detected by Western blotting. RESULTS: Compared to control, the animal mortality, lung PMNs number, W/D, MDA content and ICAM-1 expression were all significantly increased in IR group. Compared with the IR group, the blood COHb level was significantly increased and the animal mortality, lung PMNs number, W/D, MDA content and ICAM-1 expression were all significantly decreased in IR+CO group. CONCLUSION: These data suggest that exogenous CO attenuate limb IR-induced lung injury by down-regulatiny ICAM-1 expression and suppressing PMN sequestration in the lung following limb IR in rats.     

落叶果树无休眠栽培的原理与技术体系

无休眠栽培是指利用一定的措施使具有休眠特性的落叶果树避开休眠继续生长,进而开花结果的一种栽培模式。控制营养生长、保证花芽分化,使树体避开休眠,促进足够多的芽整齐萌发,避免二次休眠的发生是无休眠栽培成功的4项重要保证。温带地区无休眠栽培的研究重点是:自然休眠诱导因子的确定;花芽分化进程及自然休眠进程的精确界定;避免进入深度休眠及促芽整齐萌发的配套技术;无休眠栽培条件下树体的生长发育规律及树体综合管理技术;二次休眠现象发生的原因和克服措施;无休眠品种的选育。     

野蔷薇的DNA提取和RAPD反应体系的建立

以野蔷薇(Rosa multiflora)的冬末初春芽和夏初叶片为材料,研究了DNA的提取方法,并对影响随机扩增多态DNA(RAPD)的反应因素进行了优化.建立了适合野蔷薇RAPD的反应体系和反应程序,在20μL反应体系中,25ng模板DNA,2.0mmol/LMgCl2,0.2mmol/LdNTPs,1UTaqDNA聚合酶,0.1μmol/L引物.扩增程序为:94℃预变性4min,然后94℃变性45s,37℃退火1min,72℃延伸1min,37个循环,最后72℃延伸5min,4℃保存.     

番茄品系红熟果实的耐贮性与品质的通径分析

对11个番茄品系红熟果实在2因子4处理条件下贮藏21 d的变质率与采收时的果实品质性状进行通径分析,结果表明:变质率与果实采收时的营养成分的干物质、水分、可溶性固形物含量、糖酸比有关,其中果实干物质含量是果实变质率最重要的影响因子,其效应是由直接作用引起的.